
保存条件:避光、-20°C储存,避免反复冻融
溶解性:可溶于部分有机溶剂
英文名称:Alexa Fluor 633 Wheat Germ Agglutinin(简写:AF633-WGA)
中文名称:Alexa Fluor 633标记小麦胚芽凝集素
分子量:38kDa(二聚体结构)
激发波长:632 nm
发射波长:647 nm
规格:5mg、10mg、25mg
纯度:95%+
二、功能结构与组成AF633染料的化学特性与标记原理
AF633的荧光特性
展开剩余81%光谱性质:激发波长≈632 nm,发射波长≈647 nm,位于远红/近红外光谱区。此波段可有效穿透生物组织,减少自发荧光干扰,提升成像信噪比。
高稳定性:多芳环核心结构赋予其高摩尔吸光系数和量子产率,光漂白耐受性强,适合长时间动态观察。
溶解性:易溶于DMSO、DMF及含有机溶剂的水性缓冲液,兼容生物标记反应体系。
标记化学机制
活性基团选择:AF633通过马来酰亚胺基团与WGA的半胱氨酸残基反应,形成稳定的硫醚键。
连接臂设计:C5碳链作为连接臂,增加空间柔性,避免荧光基团干扰WGA的糖结合域。
小麦胚芽凝集素(WGA)的生物学特性
结构基础
分子组成:WGA是同型二聚体蛋白,分子量≈36 kDa,每条链含4个糖结合位点,由3-4个亚基延伸排列构成结合沟槽。
稳定性:富含二硫键(半胱氨酸占比20%),耐热、耐蛋白酶降解。
糖结合特异性
核心靶点:特异性识别 N-乙酰葡萄糖胺和唾液酸 。
结合模式:
对单糖亲和力弱,但可高亲和力结合含 β-1,4-GlcNAc重复序列的寡糖。
结合细菌细胞壁肽聚糖、真菌几丁质及哺乳动物糖脂。
AF633-WGA复合物的工作原理
(1)分子识别机制
糖基定位:WGA结构域结合细胞表面糖蛋白/糖脂的GlcNAc或唾液酸残基。
空间构象:AF633标记不改变WGA的糖结合构象,因其连接臂隔离荧光基团与结合位点。
(2)荧光信号生成与检测
信号来源:细胞表面结合的AF633-WGA受632 nm激光激发,发射647 nm远红光。
应用场景:
活细胞成像:标记质膜糖基化分布。
组织学分析:可视化纤维化瘢痕组织的糖链异常。
神经示踪:WGA可逆行运输至神经元胞体,实现神经通路追踪。
(3)技术优势
低背景干扰:远红光避开生物组织自发荧光。
多色兼容性:适用于与绿色荧光探针(如FITC)的多通道共定位。
定量潜力:荧光强度与糖基密度呈正相关。
三、关联试剂Keratin-FITC Conjugate
Myosin-FITC Conjugate
Actin-FITC Conjugate
SiR-PEG4-Maleimide
SiR-PEG4-Me-tetrazine
DPPE-N3, DPPE-叠氮
BODIPY TR Cadaverine
VIC phosphoramidite, 6-isomer
Fluorescein-5-thiosemicarbazide
AF514 carboxylic acid,AF514 COOH
AF 488 TFP ester,Alexa Fluor488 TFP ester
Alexa Fluor Plus 750 Phalloidin;Alexa Fluor Plus 750 鬼笔环肽
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